产品货号:
QN3918
中文名称:
DiD高氯酸盐
英文名称:
DiD perchlorate *Oil* [1,1’-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindodicarbocyanine perchlorate]
产品规格:
25mg
发货周期:
1~3天
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DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和DiR(深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用633nm He–Ne激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。
使用方法:
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备
①配置DMSO或EtOH储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~5mM。
注意:未使用的储存液保存在-20℃,避免反复冻融。
②工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2.悬浮细胞染色
①悬浮细胞密度为1 × 106/mL加入到工作液中。
②在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
③染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
④倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
⑤重复③,④步骤两次以上。
3.粘壁细胞的染色
①使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
②从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
③在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
④在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
⑤吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4.显微镜检测
①DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
②多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a)DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b)DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c)DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 610055.
流式细胞仪的检测DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
相关搜索:DiD高氯酸盐
使用方法:
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备
①配置DMSO或EtOH储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~5mM。
注意:未使用的储存液保存在-20℃,避免反复冻融。
②工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2.悬浮细胞染色
①悬浮细胞密度为1 × 106/mL加入到工作液中。
②在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
③染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
④倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
⑤重复③,④步骤两次以上。
3.粘壁细胞的染色
①使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
②从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
③在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
④在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
⑤吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4.显微镜检测
①DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
②多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a)DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b)DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c)DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 610055.
流式细胞仪的检测DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
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